博士案件Book分享-質體抽取服務Plasmid extraction service

發佈日期:2020-02-15

質體(plasmid)抽取服務近來已經越來越多的科研或是工業客戶和圖爾思SuperLab簽署長期合約委託我們執行,雖然這類型的服務案件看起來輕輕鬆鬆稀疏平常,但在實務上卻不是這樣。

 

  日前圖爾思生物技術服務(SuperLab)接到一個質體(plsmid)抽取的服務案件,依照客戶需求,希望能夠將某具有抗Ampicillin抗性的質體使用Stbl3 E.coli菌株作為勝任細胞,以大體積抽取純化出1 mg的量。

  原先,我們以為這個案件只是一個一般的常規案件,但因為該質體是屬於低拷貝數質體(low-copy-number plasmid),所以要達到1 mg,通常必須分多次的大體積抽取。於是在我們經由第一次以該質體DNA進行菌株轉型(transformation)、菌液培養後,利用我們圖爾思的EasyPrep EndoFree Maxi Plasmid Extraction kit V2來進行質體抽取實驗,結果只得到300~400ug的質體,故確實需要再次培養菌液進行質體抽取。根據經驗我們緊接著再取第一次所培養的少量菌液放大抽取質體,卻發現第二次抽出的DNA總量大概只有100ug。根據經驗與文獻,我們推測具有此低拷貝數質體的E.coli細胞,比起其它具有質體的菌液放在4℃下可保存的時間還要來得特別短,可能這種菌更加容易因為Ampicillin隨著時間逐漸降解而將該plasmid踢出菌外,沒有質體的細菌細胞反而因少了一個生理負擔而獲得生長優勢逐漸佔據,才會導致原本抽出來的質體濃度就已經較低的狀況下,培養一樣體積與濃度的菌液卻又獲得更少的質體。

 

 

  所以我們馬上利用在放大菌液時所另取加入甘油儲存於-80℃的菌液重新解凍,重新以四區劃線的方式塗佈於含Ampicillin的LB agar plate上,以確保可以純化分離出真正含有此抗Ampicillin質體而可存活的菌種,再挑單一菌落重新培養菌液以及進行後續的質體抽取。最後順利如期達到客戶所期許1mg的量,並且藉由限制酵素作用後膠體電泳的結果,確認DNA片段大小符合該質體的大小。雖然,這只是一個看似一般的技術服務案,但能運用我們的經驗和知識幫客戶完成,而最終也獲得了客戶滿意的回饋,我想這就是圖爾思生物技術服務團隊最開心的事了。

 

 

  圖爾思生物技術服務(SuperLab)一直以來都致力於解決客戶在科研上的疑難雜症,保證實驗技術的最高品質,以專業與熱情回應每位客戶的需求,期許成為陪伴大家走在科研路上最值得信任的夥伴。

 

訂閱圖爾思電子報

您可以從電子郵件中得到我們最新的消息與資訊

訂閱服務確認

已發送 Email 驗證信給你,請點擊信件連結以完成訂閱程序

訂閱失敗

暫時無法接受訂閱,請稍候重新嘗試