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08 2021.10

【RNAseq 3小學堂】DESeq2/DEGseq 基因差異表現量分析

     原創文章     引用請註明出處
#RNAseq #差異基因 #3小學堂
 
|| 3分鐘速解RNAseq分析,本周介紹 DESeq2/DEGseq ||
老闆說要看幾百種的基因表現量,選擇qPCR會做到手斷、選microarray沒有適合的panel,還有沒有其他選擇?? 別忘了還有RNAseq! 還不知道RNAseq好在哪?   點此回顧
了解RNAseq的優勢後,立即把樣本交給廠商分析,在拿到數據的那一刻,你是否眉頭深鎖,老闆問說這怎麼做出來的,卻只能乾笑而過?! 讓小編帶你一同了解RNAseq分析內容的眉眉角角吧!
 
|| 要做差異表現量分析,你需要注意... ||
圖爾思使用DESeq2/DEGseq進行基因差異表現量分析,先不管那些複雜的數據過濾、校正、標準化...等步驟,當我們拿到處理後的數據時我們可以得到哪些資訊? 以及有哪些重點需要注意呢?

有無重複 是否和小編一樣,看到工具名稱這麼長串覺得疑惑呢? 其實這是兩種處理樣本"有重複" 和 "無重複" 的工具。

DESeq2 → 生物性重複
DEGseq → 生物性重複

生物樣本不論是否重複,目前都對應的工具可以進行差異基因的篩選,但經過小編深入的探查,生物樣本重複,不僅能排除個體差異帶來的判讀偏差外,在發表文章時數據更具說服力、更能順利通關!

差異篩選
DESeq2/DEGseq 提供基本的兩兩比較計算結果,包括:pvalue、padj、foldchange、mean...等之外,也會提供重要的基因資訊,包括:Ensembl gene ID、NCBI基因名稱、基因功能等註釋結果(如下圖)。接下來要進行差異基因表現量分析了!! 但你可能會想:


messageImage_1632381988948.jpg
 
|| 不需操作複雜的分析介面是不錯,但是我想試試不同的篩選條件 ||
 
外送給廠商分析,基本上只提供一種篩選條件,想要更換條件除了在花$$的危機外,還要花時間來回溝通,Deadline就火燒屁股了,還要等多久?! 要省時、省錢,你需要有好的工具!
是什麼樣的好工具能夠省時、省錢、又方便呢? 敬待下回揭曉!! 



 
圖爾思生物科技/微生物體研究中心
沈筱凌/顏維萱
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