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2023．10
Non-Viral CRISPR解決方案：將細胞和基因治療研究迅速推向臨床
Non-Viral CRISPR解決方案：將細胞和基因治療研究迅速推向臨床
▎Promising Future of CRISPR Cell and Gene Therapies
CRISPR引領的細胞和基因治療猶如一場革命，具代表性的發展如現在正在進行的鐮刀型紅血球疾病的臨床試驗，以及用於癌症的CAR T和TCR治療，這都顯現CRISPR在細胞和基因治療領域的未來充滿了希望。
(圖片來源: Synthego)▎Virus packaging or RNP?
如何將sgRNA打包以傳遞進細胞，與其序列本身一樣重要!
▎What is viral transduction?
嵌入型的病毒在引入細胞時，會隨機地整合到分裂和不分裂細胞的基因組中。整合意味著這些變化可能是永久性的，通過細胞分裂進行自我複製可以傳遞給下一代。
並且，處理病毒需要BLS2以上認證和適當的保護措施。
▎What is RNP?
核糖核蛋白（RNPs）由合成的sgRNA與Cas核酸內切酶組成，是CRISPR-Cas9編輯中的關鍵材料。這種格式在保持細胞存活的同時實現高效率的編輯。相較於病毒，RNPs更為精確，並具有極低的隨機整合風險。此外，RNPs在細胞內的存在時間是短暫的，顯著降低了非預期的脫靶風險，使其成為更理想的基因編輯格式。
由於其合成的特性，RNPs的使用是安全的，不需要BSL2以上保護措施。
▎Virus v.s. RNPs
| Virus | RNP | |
傳遞方式 |
一種方式
|
多種方式
|
準備時間 |
較耗時 |
即用型 |
需要經驗 |
較多 |
較少 |
基因剔除效率 |
較低效率
|
高效率
|
精準編輯 |
較不精準隨機整合到基因組中，可能增加脫靶效應的風險 |
高度精準在目標區域進行編輯，降低脫靶效應的風險 |
毒性 |
對細胞毒性較大 |
毒性極小 |
可應用於細胞類型 |
永生細胞系、幹細胞 |
永生細胞系、幹細胞、原代細胞 |
安全性 |
需要BSL2+認證 |
無需額外安全措施 |
Synthego解決方案 |
- |
sgRNA、Cas9、CRISPR library、gene edited cells |
▎Synthego的高品質合成sgRNA–無縫引領您的基因治療研究走向臨床
BIOTOOLS所代理的Synthego以RNP的方式進行CRISPR，結合他們專有的軟體和技術，使您能夠從基礎研究和藥物開發的早期階段，進展到使用GMP等級的sgRNA（single guide RNAs）的CRISPR療法試驗階段。
Synthego在不同階段提供多種選擇支持您的研究，包括CRISPR library、sgRNA、GMP等級的材料以及基因編輯細胞株。其sgRNA從小規模的RUO等級、IND至大規模的GMP等級都可供應，此外，Synthego的sgRNA可以編輯難以轉染的細胞如iPS和原代細胞，從一開始就為基因治療的開發奠定基礎。
01 Target Identification
利用CRISPR找到您感興趣的基因，基因型與表型之間的關聯，並建立疾病模型。
支持產品: sgRNA、 Gene Knockout Kit、Arrayed CRISPR Screening Libraries
Synthego的產品可免去病毒或相關試劑的使用，為您的基因治療研究提供最安全的格式。根據您loss-of-function的實驗的規模，可以選擇CRISPR Library或Gene Knockout Kit，兩者均使用Synthego獨家multi-guide策略來確保敲除效果。
Synthego的CRISPR Library可在任何人類細胞類型，包括iPS和原代細胞中識別目標。高效率的功能性基因敲除，降低了假陰性或假陽性的風險。
陣列的格式能夠輕鬆地將基因型與表型聯繫起來，幾乎不需要數據反解析，非常適合高通量篩選分析。 篩選有助於確定基因敲除如何影響細胞治療功能，例如代謝、免疫識別等。 更重要的是，CRISPR篩選對於提供由於修飾而可能在細胞中產生的複雜表現型的理解非常有價值。 選擇Synthego的Arrayed CRISPR Library是篩選一組潛在基因標靶以進行細胞和基因治療研究的最佳選擇。
02 Target Validation
使用CRISPR來評估並選擇最佳的基因標靶。
支持產品: sgRNA、 Gene Knockout Kit、Arrayed CRISPR Screening Libraries、Immortalized Cell Clones、iPS Cell Clones
現在，您已經將焦點縮小到一組特定的基因標靶上，您可以使用Synthego的Arrayed CRISPR Library來驗證這些標靶。
選定標靶後，需要在iPS細胞或永生細胞中驗證目標嗎?Synthego提供iPS細胞及永生細胞編輯服務。無論是基因敲除還是基因插入，Synthego的細胞克隆（所有細胞都包含相同的編輯）提供Sanger定序和ICE分析驗證的序列，確保您可以準確驗證細胞治療的潛在標靶。
03 Guide Selection
確定了疾病中起關鍵作用的目標基因、突變或基因插入後，必須選擇一個最適合治療該疾病的sgRNA，以實現治療所需的編輯。
支持產品: sgRNA
Synthego的生物信息學gRNA設計工具能夠生成最佳的目標基因序列，以最小化非特異性作用和最大化特異性編輯。此外，提供sgRNA位點特異性化學修飾，可提高穩定性並保護免受細胞固有免疫反應的影響，從而實現對難以編輯的細胞類型（包括原代和iPS細胞）的卓越編輯。在編輯完成後，可以使用Synthego的免費分析工具Inference of CRISPR Edits (ICE)。快速評估您的sgRNA在基因敲除或基因插入實驗中的性能。
04 RUO to GMP Guide Validation
比較GMP與RUO sgRNA。
支持產品: RUO sgRNA、INDe sgRNA、GMP sgRNA
GMP或INDe sgRNA是臨床前和臨床試驗所需的，其編輯效率可能與RUO sgRNA不同。比較GMP或INDe sgRNA與RUO sgRNA的效能將影響最終的劑量。
Synthego提供各種高品質的sgRNA，從RUO到INDe再到GMP，使您的研究無縫接軌到臨床。
05 Preclinical Development
在具有生物相關性的細胞類型和模型中測試療法。
支持產品: INDe sgRNA、GMP sgRNA
在研發階段驗證了目標sgRNA後，可以將潛在的療法過渡到臨床前試驗。在更接近目標細胞或生物的細胞或動物模型中測試該療法的有效性及安全性，例如使用來自不同供應者的原代細胞，以及使用小型或大型動物模型。最後，要進入臨床試驗前，所有療法都必須符合GLP標準。在GLP環境中評估毒性是療法進入臨床試驗階段之前的最後一步。Synthego的INDe sgRNA符合目前所有需要進行臨床前試驗的品質和文件標準。
06 Clinical Studies
確定療法在人體中的長期安全性和有效性。
支持產品: GMP sgRNA
在臨床試驗階段，您可以放心使用Synthego的GMP sgRNA在人類志願者中進行測試，Synthego的GMP sgRNA符合FDA人體藥物的標準。 包括文件記錄、專用生產設施和經過驗證的清潔方法，Synthego的GMP sgRNA在必要的條件下生產，幫助您順利從臨床前階段過渡到臨床試驗階段。
07 Approval & Production
經過FDA批准後，藥物的製造和持續監測。
支持產品: GMP sgRNA
在藥物通過臨床試驗I至III期並獲得FDA批准後，該療法可以進行商業化。Synthego的高品質和高效率的GMP sgRNA，可以支持您的細胞療法一直到商業製造階段!
準備著展開您的細胞及基因治療研究嗎?如果您想了解更多有關我們產品的詳細資訊，請隨時與我們聯繫，或訪問官方網站以獲取更多資訊。
BIOTOOLS所代理的Synthego以RNP的方式進行CRISPR，結合他們專有的軟體和技術，使您能夠從基礎研究和藥物開發的早期階段，進展到使用GMP等級的sgRNA（single guide RNAs）的CRISPR療法試驗階段。
Synthego在不同階段提供多種選擇支持您的研究，包括CRISPR library、sgRNA、GMP等級的材料以及基因編輯細胞株。其sgRNA從小規模的RUO等級、IND至大規模的GMP等級都可供應，此外，Synthego的sgRNA可以編輯難以轉染的細胞如iPS和原代細胞，從一開始就為基因治療的開發奠定基礎。
01 Target Identification
利用CRISPR找到您感興趣的基因，基因型與表型之間的關聯，並建立疾病模型。
支持產品: sgRNA、 Gene Knockout Kit、Arrayed CRISPR Screening Libraries
Synthego的產品可免去病毒或相關試劑的使用，為您的基因治療研究提供最安全的格式。根據您loss-of-function的實驗的規模，可以選擇CRISPR Library或Gene Knockout Kit，兩者均使用Synthego獨家multi-guide策略來確保敲除效果。
Synthego的CRISPR Library可在任何人類細胞類型，包括iPS和原代細胞中識別目標。高效率的功能性基因敲除，降低了假陰性或假陽性的風險。
陣列的格式能夠輕鬆地將基因型與表型聯繫起來，幾乎不需要數據反解析，非常適合高通量篩選分析。 篩選有助於確定基因敲除如何影響細胞治療功能，例如代謝、免疫識別等。 更重要的是，CRISPR篩選對於提供由於修飾而可能在細胞中產生的複雜表現型的理解非常有價值。 選擇Synthego的Arrayed CRISPR Library是篩選一組潛在基因標靶以進行細胞和基因治療研究的最佳選擇。
02 Target Validation
使用CRISPR來評估並選擇最佳的基因標靶。
支持產品: sgRNA、 Gene Knockout Kit、Arrayed CRISPR Screening Libraries、Immortalized Cell Clones、iPS Cell Clones
現在，您已經將焦點縮小到一組特定的基因標靶上，您可以使用Synthego的Arrayed CRISPR Library來驗證這些標靶。
選定標靶後，需要在iPS細胞或永生細胞中驗證目標嗎?Synthego提供iPS細胞及永生細胞編輯服務。無論是基因敲除還是基因插入，Synthego的細胞克隆（所有細胞都包含相同的編輯）提供Sanger定序和ICE分析驗證的序列，確保您可以準確驗證細胞治療的潛在標靶。
03 Guide Selection
確定了疾病中起關鍵作用的目標基因、突變或基因插入後，必須選擇一個最適合治療該疾病的sgRNA，以實現治療所需的編輯。
支持產品: sgRNA
Synthego的生物信息學gRNA設計工具能夠生成最佳的目標基因序列，以最小化非特異性作用和最大化特異性編輯。此外，提供sgRNA位點特異性化學修飾，可提高穩定性並保護免受細胞固有免疫反應的影響，從而實現對難以編輯的細胞類型（包括原代和iPS細胞）的卓越編輯。在編輯完成後，可以使用Synthego的免費分析工具Inference of CRISPR Edits (ICE)。快速評估您的sgRNA在基因敲除或基因插入實驗中的性能。
04 RUO to GMP Guide Validation
比較GMP與RUO sgRNA。
支持產品: RUO sgRNA、INDe sgRNA、GMP sgRNA
GMP或INDe sgRNA是臨床前和臨床試驗所需的，其編輯效率可能與RUO sgRNA不同。比較GMP或INDe sgRNA與RUO sgRNA的效能將影響最終的劑量。
Synthego提供各種高品質的sgRNA，從RUO到INDe再到GMP，使您的研究無縫接軌到臨床。
05 Preclinical Development
在具有生物相關性的細胞類型和模型中測試療法。
支持產品: INDe sgRNA、GMP sgRNA
在研發階段驗證了目標sgRNA後，可以將潛在的療法過渡到臨床前試驗。在更接近目標細胞或生物的細胞或動物模型中測試該療法的有效性及安全性，例如使用來自不同供應者的原代細胞，以及使用小型或大型動物模型。最後，要進入臨床試驗前，所有療法都必須符合GLP標準。在GLP環境中評估毒性是療法進入臨床試驗階段之前的最後一步。Synthego的INDe sgRNA符合目前所有需要進行臨床前試驗的品質和文件標準。
06 Clinical Studies
確定療法在人體中的長期安全性和有效性。
支持產品: GMP sgRNA
在臨床試驗階段，您可以放心使用Synthego的GMP sgRNA在人類志願者中進行測試，Synthego的GMP sgRNA符合FDA人體藥物的標準。 包括文件記錄、專用生產設施和經過驗證的清潔方法，Synthego的GMP sgRNA在必要的條件下生產，幫助您順利從臨床前階段過渡到臨床試驗階段。
07 Approval & Production
經過FDA批准後，藥物的製造和持續監測。
支持產品: GMP sgRNA
在藥物通過臨床試驗I至III期並獲得FDA批准後，該療法可以進行商業化。Synthego的高品質和高效率的GMP sgRNA，可以支持您的細胞療法一直到商業製造階段!
準備著展開您的細胞及基因治療研究嗎?如果您想了解更多有關我們產品的詳細資訊，請隨時與我們聯繫，或訪問官方網站以獲取更多資訊。
