圖爾思推外泌體一站式分析平台、生資雲Q3上線；台美檢驗指路安全性評估守則
▲圖爾思生技主辦、台灣胞外體學會(TSEV)協辦「瘋泌- EVs為精準醫療開啟新視野：從創新應用到安全評估」研討會。(攝影/李林璦)
昨(5)日，圖爾思生技主辦、台灣胞外體學會(TSEV)協辦的「瘋泌- EVs為精準醫療開啟新視野：從創新應用到安全評估」研討會，聚焦於胞外體(EV，又稱胞外囊泡)主題，邀請產業界專家從EVs的安全性評估、法規要求進行分析，同時詳細解密外泌體miRNA分析策略，並宣布整合多資料庫miRNA雲端分析服務平台──圖爾思miRNA雲平台將在今年第三季上線。
▲台美檢驗委託研究實驗室副理江建儀(攝影/李林璦)
江建儀：以科學佐證為基礎，推動外泌體產品開發的安全評估
台美檢驗科技股份有限公司委託研究實驗室副理江建儀博士指出，外泌體技術雖於醫療、美容領域展現多元應用潛力，但目前全球針對外泌體產品的安全性規範仍屬發展中階段。包括美國食品藥物管理局（FDA）與歐盟等主要監管機構，迄今尚未針對醫療用途外泌體產品制定完整可明確依循的生物相容性與毒理測試標準項目及法規。
在台灣，目前醫療用途外泌體相關產品的研發主要依循2024年通過的《再生醫療雙法》，以及由財團法人醫藥品查驗中心（CDE）所頒布之《細胞外囊泡製劑製造與管制之研發策略指導原則》。該原則多從生物製劑角度出發，強調製程中的品質控管與病毒檢測等要求。
相較之下，台灣主管機關參考國際相關法規，於化粧品領域針對外泌體的規範及審核資料相對明確，開放人源外泌體作為化粧品成分准予個案審查，並以《化粧品衛生安全管理法》、優良製造準則（GMP）及《申請源自人體細胞之外泌體使用於化粧品之個案審查應檢送文件》作為依據，參考經濟合作與發展組織（OECD）所公告之替代性試驗方法，進行相應的安全性驗證。
在實務層面，外泌體化粧品在安全性評估上涵蓋皮膚刺激、腐蝕、過敏、眼部刺激及潛在致癌性等多種項目，依據OECD認可之非動物替代試驗方法進行，如皮膚刺激/腐蝕性測試（TG 439、TG 431）、皮膚致敏性試（TG 442C/D/E）與眼部刺激性測試（TG 492），符合國際非動物試驗趨勢。整體而言，外泌體產品發展應建立在符合科學基礎之可追溯、可驗證的安全性證據上，從法規遵循到風險控管，以利未來進一步應用於臨床或大眾市場時，確保產品之安全與信賴。
▲圖爾思微生物體研究中心生資工程師高驥(攝影/吳培安)
圖爾思微生物體研究中心的生資工程師高驥所講內容，解密外泌體 miRNA 的整體分析策略。先進行文獻與研究趨勢回顧，了解外泌體中特定 miRNA 表現量與消化系統疾病、神經疾病等多種疾病相關，突顯其研究的重要性。多數外泌體 miRNA 研究可劃分為三個主要步驟。首先是外泌體樣本的收集來源，例如血漿或細胞培養液。第二步為外泌體的分離與 miRNA 的萃取。最後則是 miRNA 的分析，常用的技術包括 RT-qPCR、microarray、NGS 等，而本次則重點介紹圖爾思所開發的NGS miRNA 分析策略。
在取得 miRNA NGS 原始數據後，為避免「垃圾進，垃圾出」（GIGO）的情況發生，數據品質極為關鍵。此階段需利用工具如 Cutadapt 與 Fastp 來移除接頭序列（Adaptor）與低品質讀序，並檢查讀長分佈，特別是以約 20bp 的 mature miRNA 為主要觀察對象。接著，會使用 Bowtie 工具將序列比對至目標物種的參考基因組。
初步處理後，進入 miRNA 的對應與分類分析。利用 miRDeep2 將讀序比對至 miRBase 資料庫以辨識已知 miRNA，隨後透過 Rfam、Dfam 與 Ensembl 等資料庫確認與過濾非 miRNA 的讀序，最後再進行 Novel miRNA預測。接著可進行 miRNA 的差異表現分析與標靶基因預測，其中包含經典工具 miRanda，以及專注於最小自由能（Minimum Free Energy, MFE）評估的 RNAhybrid。本流程將兩者的預測結果交集，以提升標靶基因預測的準確性。
最後，研究者可針對預測的標靶基因進行功能富集分析，並結合延伸資料庫進一步探索 miRNA 的生物學意義。例如：HMDD 用於分析與疾病的關聯、ncRNADrug Database 協助探索 miRNA 與藥物的交互作用，以及 ExoCarta 提供與外泌體相關的資訊等，建構更全面的 miRNA 生物資訊分析框架。
而講者也指出目前分析上較大的挑戰還是在於外泌體miRNA的多樣性、資料庫維護程度與完整性、跨資料庫查詢整合不易，讓分析十分困難與複雜，也因此，圖爾思預計在2025年Q3推出「miRNA雲平台」，一站式整合各種miRNA相關資料庫與功能分析，讓使用者可更加便利地進行研究分析。
▲圖爾思生技蕭楹澄產品經理(攝影/李林璦)
蕭楹澄：圖爾思生技打造EV一站式服務平台
圖爾思生技蕭楹澄產品經理表示，EV產學研究相當蓬勃，且目前全球已經有471項外泌體臨床試驗、涵蓋200種疾病，其中又以EV作為檢驗診斷為主流。然而，EV發展迄今，純化、分析、驗證的標準化卻都尚未確立，是EV領域必須克服的關鍵挑戰。為此圖爾思則針對EV的全面性分析需求，提供從分離、鑑定到內含物分析的一站式服務平台，並透過標準作業程序（SOP），在最短的時間內為科學家完成分析，確保品質及實驗的再現性。
在EV純化方面，圖爾思針對不同樣本規模，提供多樣化的解決方案，對於微量樣品可採用切向流過濾（TFF）搭配專利的流體輔助分離技術（FAST）之純化系統 Exodiscovery，而針對2-250ml大體積樣品，則可使用奈米孔膜（ANM）純化系統NanoEX。在鑑定方面則可透過奈米流式細胞儀(NanoFCM)，提供粒徑濃度、表面標誌(CD9, CD63, CD81等)、磷脂質標記分析、客製化染色等項目。此外，圖爾思也在EVs特徵分析提供穿透式電子顯微鏡(TEM)、西方墨點法(Western Blotting)等服務；今年更預計在Q3新增Malvern NanoSight Pro的奈米顆粒追蹤分析技術(NTA)服務，提供客戶更全方位EV分析平台。
在EV內含物分析方面，圖爾思提供針對miRNA的單標靶或多重標靶分析，並已建立9種分析套組(panel)，能以少量樣本在短時間內分析多個目標miRNA。蛋白質分析上，則利用質譜儀(LC-MS/MS)進行蛋白質體學的高通量篩選，並透過Q-plex和ABplex等多重蛋白質分析平台進行驗證。此外，為加速臨床診斷標誌的開發，更引進PBA技術，可一次性分析超過500種EV表面蛋白，大幅提升生物標誌的發掘效率。圖爾思致力於成為科學家在EV研究領域的最佳夥伴，透過提供專業、可靠且標準化的分析服務，協助產學界將研究成果快速推向臨床應用，實現精準醫療的未來。
▲綜合座談中邀集專家為觀眾解答EV如何加速落地到臨床應用(攝影/李林璦)
在最後的綜合座談中，針對EV如何加速落地到臨床應用的疑問，亞東醫院醫學研究部研究員廖秀蓉表示臺灣還是以「藥品」來定義外泌體療法，也許有機會搭配細胞治療、或是以合併療法的形式推動臨床開發，但還是要通過臨床試驗來驗證安全性與療效。
此外，在場專家也針對如何確保EV的「有效期限」分享觀點。江建儀表示，目前外泌體化粧品的法規監管主要以安全性和穩定性為主，而不是從療效考量，且沒有後續的追溯驗證；臺灣大學植物病理與微生物學系教授沈湯龍則說明，不同來源的EV在保存和活性上都各有差異，但EV是一種會在短時間內大量減少的生物成分，建議民眾勿輕信聲稱外泌體量多就是好的化粧品。
(報導/吳培安、李林璦)
▍文章轉發：環球生技
