Nano DSC 高靈敏度差示掃描熱量儀
Nano DSC (Differential Scanning Calorimeters) 是由 TA Instruments 研發的高靈敏度差示掃描熱量計,專為表徵生物分子的熱穩定性、高親和力配體結合及多結構域結構解析而設計 。該儀器能精確測量稀釋生物分子溶液在受控的加熱或冷卻過程中,因結構變化所吸收或釋放的極微量熱量 。在生物製藥產業中,Nano DSC 是評估蛋白質藥物穩定性的關鍵工具 。透過測定熔點溫度與焓變,研發人員可針對抗體進行結構域穩定性分析、優化製劑配方篩選,並在品質控制中監測產品的一致性 。
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儀器特徵
差示掃描熱量儀 (DSC) 的分析原理
與 ITC 專注於「分子結合」不同,Nano DSC 是一種熱掃描技術,其原理是透過控制溫度升降,來測量稀釋溶液中生物大分子的熱穩定性與熱容變化。
恆壓熱容測量:在恆定壓力下,DSC 用於判定蛋白質等生物分子在加熱或冷卻掃描過程中的偏莫耳熱容(Partial molar heat capacity)變化。
蛋白質熱展開 (Thermal Unfolding) 過程
1. 初始基線:在加熱初期,蛋白質尚未變性,圖譜會呈現一段隨溫度微幅上升的平緩基線。
2. 吸熱峰(Endothermic Peak)的形成:隨著溫度持續升高並達到大分子的特徵溫度範圍時,蛋白質的高級結構開始被破壞並發生熱展開(Thermal Unfolding / 變性)。由於非共價鍵的斷裂是一個吸收能量的過程,蛋白質會在此時大量吸收熱量,在圖譜上形成一個明顯的吸熱峰。
3. 新基線建立:當蛋白質完全展開(變性結束)後,熱吸收停止,系統會重新建立一段變性後的全新基線。
透過分析這個吸熱峰,科學家可以精確測定出蛋白質的熔點溫度以及展開焓變,進而解構複雜蛋白質中各個個別結構域(Domains)的穩定性與相互作用。
核心特性:
極致分析性能:最高靈敏度與超低樣品體積。
毛細管量熱池設計:專為易聚集或沉澱的複雜樣品提供精確分析。
內建精密加壓系統:在量熱池內始終維持準確且恆定的壓力。
固態熱電控制元件:在加熱與冷卻掃描過程中提供極其精確的溫度控制。
升級自動進樣系統:可搭配經產業驗證的 HPLC 等級自動進樣器,實現可靠的高通量樣品處理。
與 ITC 專注於「分子結合」不同,Nano DSC 是一種熱掃描技術,其原理是透過控制溫度升降,來測量稀釋溶液中生物大分子的熱穩定性與熱容變化。
恆壓熱容測量:在恆定壓力下,DSC 用於判定蛋白質等生物分子在加熱或冷卻掃描過程中的偏莫耳熱容(Partial molar heat capacity)變化。
蛋白質熱展開 (Thermal Unfolding) 過程
1. 初始基線:在加熱初期,蛋白質尚未變性,圖譜會呈現一段隨溫度微幅上升的平緩基線。
2. 吸熱峰(Endothermic Peak)的形成:隨著溫度持續升高並達到大分子的特徵溫度範圍時,蛋白質的高級結構開始被破壞並發生熱展開(Thermal Unfolding / 變性)。由於非共價鍵的斷裂是一個吸收能量的過程,蛋白質會在此時大量吸收熱量,在圖譜上形成一個明顯的吸熱峰。
3. 新基線建立:當蛋白質完全展開(變性結束)後,熱吸收停止,系統會重新建立一段變性後的全新基線。
透過分析這個吸熱峰,科學家可以精確測定出蛋白質的熔點溫度以及展開焓變,進而解構複雜蛋白質中各個個別結構域(Domains)的穩定性與相互作用。
核心特性:
極致分析性能:最高靈敏度與超低樣品體積。
毛細管量熱池設計:專為易聚集或沉澱的複雜樣品提供精確分析。
內建精密加壓系統:在量熱池內始終維持準確且恆定的壓力。
固態熱電控制元件:在加熱與冷卻掃描過程中提供極其精確的溫度控制。
升級自動進樣系統:可搭配經產業驗證的 HPLC 等級自動進樣器,實現可靠的高通量樣品處理。
效能展示
卓越的高靈敏度與數據重現性

此數據充分展現了 Nano DSC 的靈敏度與準確性 。將雞蛋清溶菌酶(置於 pH 4.0 的甘胺酸緩衝液中)配製成各種不同的濃度 。在毛細管量熱池中,僅需低至 2 µg 的溶菌酶,就足以提供高品質的數據,其獲得的定量結果與使用 100 倍樣品量的實驗完全相同。


蛋白質穩定性測量

Nano DSC 非常適合用於準確且精密地測量蛋白質穩定性。其無與倫比的熱流基線重複性,使其能夠在極稀薄的溶液中,精確測量蛋白質的變性(非折疊)與偏莫耳熱容。
技術應用
1. 蛋白質藥物與單株抗體研發 (Biologics & Antibody Development)
主要應用:熔點測定、高級結構(Higher-order Structure)變異評估、多結構域(Multi-domain)解離解析。
2. 基因治療與新型藥物遞送系統 (Gene Therapy & Advanced Delivery Systems)
主要應用:腺相關病毒(AAV)與脂質奈米顆粒(LNP)載體特徵分析、靶向功能穩定性評估。
3. 難溶性與極高親和力配體結合篩選 (Challenging & High-Affinity Drug Screening)
主要應用:超高親和力分子交互作用評估、與低溶解度小分子配體結合之熱力學表徵。
4. 製劑配方優化與凍乾製程支持 (Formulation Optimization & Lyophilization Support)
主要應用:藥物貨架壽命(Shelf-life)預測、製劑緩衝液與添加劑篩選、凍乾保護評估。
5. 高通量自動化品質控制 (Automated Industrial Quality Control)
主要應用:抗體藥物批次一致性檢測、貴重生物原料微量化質量控制。
主要應用:熔點測定、高級結構(Higher-order Structure)變異評估、多結構域(Multi-domain)解離解析。
2. 基因治療與新型藥物遞送系統 (Gene Therapy & Advanced Delivery Systems)
主要應用:腺相關病毒(AAV)與脂質奈米顆粒(LNP)載體特徵分析、靶向功能穩定性評估。
3. 難溶性與極高親和力配體結合篩選 (Challenging & High-Affinity Drug Screening)
主要應用:超高親和力分子交互作用評估、與低溶解度小分子配體結合之熱力學表徵。
4. 製劑配方優化與凍乾製程支持 (Formulation Optimization & Lyophilization Support)
主要應用:藥物貨架壽命(Shelf-life)預測、製劑緩衝液與添加劑篩選、凍乾保護評估。
5. 高通量自動化品質控制 (Automated Industrial Quality Control)
主要應用:抗體藥物批次一致性檢測、貴重生物原料微量化質量控制。
規格
| Temperature Range | -10 °C to 130 °C |
| Scan Rates | 0.001 °C to 2 °C/min |
| Short-term Noise | 0.015 µWatts |
| Baseline Repeatability | 0.028 µWatts |
| Cell Configurations | Fixed Capillary / Cylindrical |
| Cell Materials | Platinum / Gold |
| Response Time | 5 sec |
| Active Cell Volume | 300 µL / 330 µL |
| Required Sample Volume | 500 µL / 450 µL |
| Pressure Control | Built-in 0 to 6 atmospheres |
| Heat Measurement Type | Power Compensation |
| Automation Specifications | |
| Sample Capacity | 2 standard 96-well plates, 490 µL/sample, 800 µL/reference |
| Sample Tray Temperature Range | Ambient to 4 °C |
| Wash / Rinse Solvent Ports | 5 on side of autosampler |
| 2 for autosampler syringe |